彩琉璃神社※邪恶道acg-成年人av在线免费播放-国产精选视频在线免费观看-亚洲高清无遮挡在线观看

液相芯片，也稱為微球體懸浮芯片（suspension array，liquid chip），是基于xMAP（flexible Multi�睞nalyte Profiling）技術(shù)的新型生物芯片技術(shù)平臺(tái)，它是在不同熒光編碼的微球上進(jìn)行抗原�部贵w、酶�驳孜�、配體�彩荏w的結(jié)合反應(yīng)及核酸雜交反應(yīng)，通過紅、綠兩束激光分別檢測(cè)微球編碼和報(bào)告熒光來達(dá)到定性和定量的目的，一個(gè)反應(yīng)孔內(nèi)可以完成多達(dá)100種不同的生物學(xué)反應(yīng)，是繼基因芯片、蛋白芯片之后的新一代高通量分子檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)。迄今為止十年時(shí)間，全球已有數(shù)百套基于xMAP技術(shù)的檢測(cè)平臺(tái)用于免疫學(xué)、蛋白質(zhì)、核酸檢測(cè)、基因研究等領(lǐng)域，該技術(shù)已成為一種新的蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)研究工具，也是最早通過美國(guó)食品與藥物管理局（FDA）認(rèn)證的可用于臨床診斷的生物芯片技術(shù)。

　　1  液相芯片技術(shù)的原理

　　液相芯片體系由許多大小均一的圓形微球（直徑5.5～5.6 μm）為主要基質(zhì)構(gòu)成，每種微球上固定有不同的探針分子，將這些微球懸浮于一個(gè)液相體系中，就構(gòu)成了一個(gè)液相芯片系統(tǒng)，利用這個(gè)系統(tǒng)可以對(duì)同一個(gè)樣品中的多種不同分子同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，這種被稱之為xMAP的檢測(cè)技術(shù)是1997年由美國(guó)Luminex公司開發(fā)出來的。

　　在液相系統(tǒng)中，為了區(qū)分不同的探針，每一種固定有探針的微球都有一個(gè)獨(dú)特的色彩編號(hào)，或稱熒光編碼。在微球制造過程中摻入了紅色和橙色兩種熒光染料（這兩種染料各有10種不同區(qū)分），從而把微球分為100種不同的顏色，形成一個(gè)具有獨(dú)特光譜地址的含有100種不同微球的陣列。不同顏色微球在分類激光激發(fā)下產(chǎn)生的熒光互不相同，這種分類熒光是識(shí)別不同微球的唯一途徑。利用這100種微球，可以分別標(biāo)記上100種不同的探針分子。

    檢測(cè)時(shí)先后加入樣品和報(bào)告分子與標(biāo)記微球反應(yīng)，樣品中的目的分子（待檢測(cè)的抗原或抗體、生物素標(biāo)記的靶核酸片段、酶等）能夠與探針和報(bào)告分子特異性結(jié)合，使交聯(lián)探針的微球攜帶上報(bào)告分子藻紅蛋白，隨后利用儀器（如Luminex 100）對(duì)微球進(jìn)行檢測(cè)和結(jié)果分析。Luminex 100采用微流技術(shù)使微球快速單列通過檢測(cè)通道，并使用紅色和綠色兩種激光分別對(duì)單個(gè)微球上的分類熒光和報(bào)告分子上的報(bào)告熒光進(jìn)行檢測(cè)。紅色激光可將微球分類，從而鑒定各個(gè)不同的反應(yīng)類型（即定性）；綠色激光可確定微球上結(jié)合的報(bào)告熒光分子的數(shù)量，從而確定微球上結(jié)合的目的分子的數(shù)量（即定量）。因此，通過紅綠雙色激光的同時(shí)檢測(cè)，完成對(duì)反應(yīng)的實(shí)時(shí)、定性和定量分析。

    2  液相芯片技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)

　　液相芯片技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)在于：僅需少量樣本即可同時(shí)定性、定量檢測(cè)同一樣本中的多種不同目的分子，即多重檢測(cè)（multiplexing）。具體說來，與常規(guī)免疫學(xué)或核酸檢測(cè)方法相比，液相芯片技術(shù)具有以下顯著優(yōu)點(diǎn)。

    2.1  高通量

    可對(duì)同一樣本中的多種不同目的分子同時(shí)進(jìn)行實(shí)時(shí)、定性、定量分析。從理論上說，如果不存在交叉反應(yīng)，檢測(cè)的通量等于微球的種類數(shù)，目前最多可達(dá)到100種。這遠(yuǎn)勝過一次只能檢測(cè)一個(gè)項(xiàng)目的傳統(tǒng)免疫分析法。

    2.2  樣本用量少

    由于在同一個(gè)反應(yīng)孔中可以同時(shí)完成100種不同的生物學(xué)反應(yīng)，所以大大節(jié)省了樣本用量，少至1μl的樣本即可檢測(cè)，非常適合分析小體積稀有樣品。

    2.3  操作簡(jiǎn)單、快速

    由于是基于液相反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，因此反應(yīng)速度快，孵育時(shí)間比傳統(tǒng)的固相檢測(cè)短。進(jìn)行免疫學(xué)分析時(shí)，若使用高親和力抗體，2～3 h內(nèi)即完成檢測(cè)，而核酸雜交分析在PCR擴(kuò)增后1 h內(nèi)可得到結(jié)果。

    2.4  靈敏度高

    微球表面積大，每個(gè)微球上可包被100 000個(gè)捕獲抗體，如此高密度的捕獲抗體保證了能夠最大程度地與樣本中的抗原分子結(jié)合，提高檢測(cè)靈敏度。最低檢測(cè)濃度可達(dá)到0.1 pg/ml.

    2.5  檢測(cè)范圍廣

    可達(dá)3～5個(gè)數(shù)量級(jí)（如Bio�睷ad公司細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)范圍達(dá)到0.2～32 000 pg/ml，樣品無需濃縮或稀釋。